Nature.com saytına daxil olduğunuz üçün təşəkkür edirik.İstifadə etdiyiniz brauzer versiyasında məhdud CSS dəstəyi var.Ən yaxşı təcrübə üçün sizə yenilənmiş brauzerdən istifadə etməyi tövsiyə edirik (və ya Internet Explorer-də Uyğunluq rejimini söndürün).Bu arada, davamlı dəstəyi təmin etmək üçün biz saytı üslub və JavaScript olmadan təqdim edəcəyik.
Post-travmatik stress pozğunluğu (TSSB) travma ilə əlaqəli siqnallara qorxu reaksiyalarını neytrallaşdırmaq qabiliyyətinin pozulması ilə xarakterizə olunur.İnsan və heyvan tədqiqatları qorxunun yatırılmasının müvəffəqiyyətini müəyyən edən əsas vasitəçilər kimi frontal korteksin müəyyən sahələrinin cəlb edilməsində fərqlərə işarə edir, lakin bu sahələrin diferensial iştirakını müəyyən edən sinir sxemlərinin qarşılıqlı təsiri aydın deyil.Sönmənin geri çağırılmasındakı fərdi fərqlərin neyron dövrə fəaliyyətindəki fərqlərdə necə əks olunduğunu daha yaxşı başa düşmək üçün biz siçovulların sublimbik korteksindən (IL) retrograd izləyicilərlə proqnozları etiketlədik və IL proyeksiya neyronlarının daxilində və xaricində neyron proqnozlarını müqayisə etdik.Biz bu məlumatları siçovullarda solğun yaddaşın saxlanma dərəcəsinə görə qruplaşdıraraq təhlil etdik.Biz IL-proyeksiya edən hüceyrələrdə, posterior paratalamusun neyronlarının siçovullarda artan aktivlik nümayiş etdirdiyini, bu da yaxşı tükənmə xatırlama nümayiş etdirdiyini aşkar etdik.IL-proyeksiya edən hüceyrələrə əlavə olaraq, yaxşı həlli ilə siçovul klaustrumunun və ventral hipokampusun seçilmiş sahələrində artan Fos aktivliyi müşahidə edildi.Nəticələrimiz göstərir ki, sönmənin geri çağırılmasındakı fərqlər IL proqnozları daxilində və xaricində sinir fəaliyyətinin xüsusi nümunələri ilə əlaqələndirilir.
Qorxu kondisioneri neytral stimulun aversive şərtsiz stimul (UCS) ilə əlaqələndirildiyi zaman baş verir ki, ilkin neytral stimul, indi şərti stimul (CS), UCS olmadıqda şərti qorxu cavabı (CR) yaradır.Şərti qorxunun geri çevrilməsi, UCS1 olmadıqda CS-nin təkrar təqdimatı səbəbindən CR-nin CS-yə azalması ilə idarə olundu.Əvvəlki araşdırmalar göstərdi ki, travma sonrası stress pozğunluğu (TSSB) şərti qorxu reaksiyalarının yox olmasını xatırlamaq qabiliyyətinin olmaması ilə əlaqələndirilir2.Post-travmatik stress pozğunluğunun müalicəsi üçün koqnitiv davranış terapiyasının təməl daşı öyrənilmiş qorxu reaksiyalarının yox olmasına əsaslanan məruz qalma terapiyasıdır3,4.Buna görə də, gəmiricilərin nəsli kəsilmək qorxusunda və əsas sinir mexanizmlərində fərdi fərqlərin tədqiqi, insanın travmaya reaksiyasında və post-travmatik stress pozğunluğunun müalicəsində fərqləri aydınlaşdırmağa kömək edə bilər.Uğurlu və uğursuz sönmə xatirələrini fərqləndirən sinir mexanizmlərinin müəyyən edilməsində irəliləyişlərə baxmayaraq, hələ çox şey kəşf edilməlidir.
Gəmirici modelləri bu işdə faydalıdır, çünki gəmiricilərin məhv olmasını xatırlamaqda əhəmiyyətli fərdi fərqlər var7,8,9,10.Əhali səviyyəsində qorxunun yox olmasının sinir mexanizmlərini araşdıran əvvəlki iş göstərdi ki, nəsli kəsilənlərin geri çağırılması üçün infralibik korteksin (IL) aktivləşdirilməsi tələb olunur (refs 11, 12, 13, lakin bax 14) və bəzi tədqiqatlar qorxunun azaldığını aşkar etdi. IL-də gəmirici fəaliyyəti yaxşı qorxulan gəmiricilərlə müqayisədə nəsli kəsilmək haqqında zəif yaddaş nümayiş etdirir.Bununla belə, IL-lərin gəmiricilərdə qorxunun aradan qaldırılmasında differensial şəkildə iştirak etdiyi mexanizmlər daha zəif məhv olanlarla müqayisədə aydın deyil.
Ehtimallardan biri odur ki, fərdlər arasında qorxunun yox olma yaddaşındakı fərqlər xüsusi afferent IL-lərin diferensial aktivləşməsinin nəticəsidir.Anatomik tədqiqatlar18 göstərdi ki, beynin müxtəlif kortikal və subkortikal sahələri IL-yə sıx proyeksiyalar göndərir, bu da öz növbəsində beynin bir çox sahələrinə efferent proyeksiyalar göndərir.Əhali səviyyəsində tədqiqatlar göstərdi ki, amigdalaya IL proqnozları qorxunun yox olması üçün vacibdir20,21,22 və bazolateral amigdaladan (BLA) IL girişi də yox olma öyrənilməsi ilə əlaqələndirilir.Son araşdırmalar həm ventral, həm də dorsal hipokampusun IL-nin proqnozlaşdırılmasında iştirak etdiyini göstərir, baxmayaraq ki, IL mərkəzli sxemlərin məhv olmanın xatırlanmasında iştirakı ilə bağlı daha az tədqiqat var.Görünür, IL-nin talamusun rekombinasiya edən nüvəsinə efferent proqnozları da qorxunun yox olmasının yaddaşında iştirak edir.
Bu əvvəlki tədqiqatlar sönmənin xatırlanmasında iştirak edən sinir dövrələrinin qarşılıqlı təsirinin şəklini çəkməyə başlayır, lakin IL-mərkəzli sinir dövrələrində fəaliyyətin sönmə xatırlamasında fərdi fərqlərə təsir edib-etmədiyinə dair çox az məlumat var.Burada fərdlər arasında qorxunun yox olması yaddaşındakı fərqlərin beynin xüsusi bölgələrində IL giriş aktivasiyasındakı dəyişikliklərlə əlaqəli olub olmadığını müəyyən etməyə çalışdıq.Xüsusilə, talamusun (PVT), körpücük sümüyü (CLA), BLA və ventral hipokampusun (vHPC) paraventrikulyar nüvəsində IL afferent hüceyrələrinin aktivləşdirilməsini qiymətləndirdik.Bu beyin bölgələri həm IL-ə sıx proqnozlar göndərdikləri üçün, həm də qorxunun yox olmasının ifadəsində iştirak edə biləcəyindən şübhələnmək üçün əsas olduğuna görə seçilmişdir 18 .Məsələn, bu yaxınlarda aparılan bir araşdırma göstərdi ki, PVT, qorxu əldə etmə və çoxalma ilə məşğul olduğu bilinən bir bölgə, nəsli kəsilən çoxalma üçün tələb olunur.Bundan əlavə, əvvəlki tədqiqatlar sönmə yaddaşını ifadə edən siçovullarda bazal amigdala və vHPC aktivliyinin artdığını göstərdi.Nəhayət, klaustrumun təhlili əvvəlki işlərin heç birinin yox olmaqda rolunu qiymətləndirmədiyini nəzərə alaraq daha kəşfiyyatlıdır.Bununla belə, bu yaxınlarda aparılan işlər onun qorxunun kontekstdə şərtləndirilməsində rol oynadığını göstərir29.
Viral GFP ilə birləşdirilmiş retrograd izləyicilər davranış testindən əvvəl siçovulların IL-yə yeridildi və IL afferentlərində Fos aktivliyi yox olma təkrarı, qorxu xatırlama və davranış testinə məruz qalmayan siçovullarda ölçüldü.Nəticələrimiz göstərir ki, posterior paraventrikulyar talamusdan IL-ə qədər olan proqnozlar nəsli kəsməyi uğurla xatırladan siçovullarda artan aktivliyi göstərir.IL proqnozlarına əlavə olaraq, yaxşı geriləyən siçovullarda körpücük sümüyü və ventral hipokampusun müəyyən sahələrində sinir fəaliyyəti artmışdır.Nəticələrimiz göstərir ki, IL-ə proqnozlaşdırılan daxili və xarici sinir fəaliyyətinin nümunələri qorxunun məhv olması yaddaşındakı fərdi fərqlərlə əlaqələndirilir.
Subyektlər olaraq Charles River Laboratories (Raleigh, NC) əldə edilmiş əlli dörd yetkin erkək Sprague-Dawley siçovulları (gəlişdə 300-325 g) istifadə edilmişdir.Siçovullar 12 saatlıq işıq/qaranlıq dövründə (səhər saat 7-də işıqlar yanır) qida və suya sərbəst giriş imkanı ilə cüt-cüt yerləşdirilib.Bu təcrübələr üçün iki qrup siçovul (n = 28 və n = 26) istifadə edilmişdir.Ölüm, cərrahi səhv, hədəf saytda GFP ifadəsinin olmaması, zəif toxuma keyfiyyəti və davranış problemləri (Metodlarda izah olunur) istisna edildikdən sonra nəsli geri çağıran qrupa 21 siçovul, qorxu geri çağırma qrupuna isə 7 siçovul, ev qəfəsləri daxildir.qrup 7 siçovuldan ibarət idi (son analizə 35 siçovul daxil edilmişdir).Bütün prosedurlar Stony Brook Universitetinin İnstitusional Heyvanlara Qulluq və İstifadə Komitəsi tərəfindən təsdiqləndi və ARRIVE Təlimatlarına (https://arriveguidelines.org) və NIH Laboratoriya Heyvanlarına Baxım və İstifadə Təlimatlarına uyğun idi.
Siçovullar əməliyyatdan iki gün əvvəl müalicə olundu.Siçovullar ketamin (87 mq/kq) və ksilazin (10 mq/kq) ilə anesteziya edildi, stereotaksik aparata (Stoelting, Woodale, IL) yerləşdirildi və IL-yə birtərəfli AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) enjeksiyonları aldı.(sol və sağ inyeksiyaları tarazlayın).Enjeksiyon üçün 22 kalibrli kanül yerinə endirilmişdir (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Dəqiqədə 0,15 µl sürətlə 0,6 µl virus ötürmək üçün 28G daxili kanül (PE 20 borusu vasitəsilə infuziya nasosuna qoşulmuş) daxil edin və infuziya toxunulmaz olduqdan sonra 5 dəqiqə yerində saxlayın..Tikişdən sonra siçovullara meloksikam (1 mq/kq) yeridilmiş və hərəkət edə bilən kimi qəfəslərinə qaytarılmışdır.Virusun bərpası və retrograd daşınması üçün siçovullar təxminən 7 həftə öz qəfəslərində saxlanılıb.Üç siçovul anesteziya altında öldü, nəticədə 51 siçovul (94%) əməliyyatdan uğurla sağaldı.
Bütün prosedurlar 45,7 sm × 43,2 sm × 43,2 sm ölçülərində səs uducu izolyasiya qutularında (Clever Sys. . Inc.) yerləşdirilən 32 sm × 25 sm × 21 sm kondisioner kameralarında (Clever Systems Inc., Reston, VA) yerinə yetirildi.).Sönmənin öyrənilməsi və sönmənin geri çağırılması sessiyaları zamanı kontekst orijinal şərti kontekstdən fərqli olaraq dəyişdirildi.Vəziyyət A (qorxu yaratma) 28 volt közərmə lampası, məişət lampaları (Chicago Micro Lighting, Böyük Britaniya), B şərtinə (sönmə təlimi, sönmənin geri çağırılması testi və qorxunun geri çağırılması testi) infraqırmızı LED lampaları (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) daxildir. ., Çin;U48R).Bundan əlavə, A Kontekstində paslanmayan polad və pleksiglas divarları olan vibrasiyaya qarşı laylı döşəmə olduğu halda, B kontekstində döşəmə və divarlara yerləşdirilmiş boyalı metal əlavələr var.Kontekst B forması da standart kondisioner kamerasına 33,5 sm x 21,3 sm əyri metal əlavə yerləşdirməklə dəyişdirildi.Bundan əlavə, A kontekstində kameralar 5% sirkə turşusu ilə, B kontekstində isə kameralar 5% ammonium hidroksidlə silinib.Nəhayət, B kontekstində siçovullar arabalardakı qəfəslərdə yuvarlanmaq əvəzinə, vedrələrdə sınaq otağına gətirildi.Davranış seansları üst kamera ilə qeydə alınıb və hər kameradan gələn video siqnal, piksel dəyişiklikləri əsasında solma davranışını qiymətləndirən proqram təminatına (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) ötürülüb.Parametrlər elə seçilmişdir ki, kompüter tərəfindən təxmin edilən sönmə davranışı əl ilə təxmin edilən təlim keçmiş müşahidəçilərin davranışına yaxından uyğun gəlsin.30 saniyəlik intervalda yığılmış donma vaxtının faizini göstərən dəyər.
Bütün davranış proqramları işıq/qaranlıq dövrünün işıqlı hissəsində həyata keçirilir.Siçovullar davranış prosedurlarının başlamasından 5 gün əvvəl müalicə edildi və müalicənin son üç günü ərzində davranış otağına aparıldı.Davranış testinin ilk günündə bir qrup nəslini geri çağıran siçovullar qorxu şərti refleksinə yerləşdirildi, sonra A kontekstinə yerləşdirildi, 6 dəqiqəlik stimullaşdırılmamış uyğunlaşma müddəti verildi və sonra hər iki 4 kHz, 76 dB, 30 s birləşmələri verildi. .ton və ümumi dayandırma, 1,0 mA, zərbə 1 s (2 dəq ITI).Bütün davranış təlimləri üçün siçovullar stimulun son təqdimatından 2 dəqiqə sonra qəfəslərə qaytarıldı.Ertəsi gün nəsli kəsmə-yada salma qrupundan olan siçovullar B kontekst otağına yerləşdirildi və 6 dəqiqəlik məskunlaşma dövründən sonra nəsli kəsmə təlimi kimi 20 səs təqdimatı (2 dəq İTİ) yerinə yetirdi.Ertəsi gün nəsli kəsilən çoxalma qrupunda olan siçovullar nəsli kəsilmə testi olaraq 6 dəqiqəlik uyğunlaşma müddətindən sonra B kontekstində 4 tona məruz qaldılar.Nəsli kəsilmiş yaddaş qrupundakı siçovullara davranış seansından 60 dəqiqə sonra perfuziya verildi.Qorxu xatirələrini oyadan bir qrup nəzarət siçovulları A kontekstində qorxu şərtləndirilmiş cavabın ilk günündə eyni prosedura məruz qaldı. Qırx səkkiz saat sonra siçovullar B kontekst otağına yerləşdirildi və 4 audio təqdimata məruz qaldı (2- dəqiqə ITI) geri çağırma testi kimi.6 dəqiqəlik uyğunlaşma müddətindən sonra qorxu.Siçovullara davranış seansından 60 dəqiqə sonra perfuziya verildi.Bir qrup ev nəzarət siçovulu təcrübə boyu ev qəfəslərində qaldı və eksperimental siçovullarla eyni gündə perfuziya edildi.İki siçovul qrupunun hər biri iki seriyaya bölündü və hər qrupdakı heyvanların sayı seriyalar arasında balanslaşdırıldı.Qorxu yaddaşı qrupunda olan bir siçovul, qorxunun kondisioner əlamətləri göstərmədiyi üçün təhlildən xaric edildi (qorxu xatirələri testi zamanı vaxtın 15%-dən azında donma).Davranış qrafikinin diaqramı üçün Şəkil 2A-a baxın.
Siçovullar Fatal Plus məhlulu (100 mq/kq) ilə həddindən artıq dozada qəbul edilib, sonra buz kimi soyuq 10% PBS və ardınca 10% tamponlanmış formalin ilə perfuziya edilib.Beyin çıxarıldı və təxminən 1 həftə 4 ° C-də formalin içində 30% saxaroza məhlulunda saxlanıldı.Sonra beyin donduruldu və 40 mikron qalınlığında bir kriostata kəsildi.Bölmələr ardıcıl olaraq 10% PBS-də 4°C-də saxlanıldı.Daha sonra, maraqlandıran beyin bölgəsini ehtiva edən sərbəst üzən bölmələrdə immunofluoressensiya aparıldı.Bölmələr hər biri 5 dəqiqə ərzində 10% PBS-də 3 dəfə yuyuldu.Sonra bölmələr otaq temperaturunda 2 saat normal keçi serumunun 5% bloklayıcı məhlulunda inkubasiya edildi və sonra hər biri 10% PBS ilə 5 dəqiqə daha üç dəfə yuyuldu.Bölmələr daha sonra 10% PBS-də 1% BSA-da seyreltilmiş əsas antikorlarda (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) 4° C-də gecə ərzində inkubasiya edildi.Ertəsi gün bölmələr 4°C-də 30 dəqiqə ərzində 10% PBS-də, sonra 10% PBS-də 3 dəfə 5 dəqiqə ərzində yuyuldu və ikincil antikor (Alexa Fluor 594 keçi anti-dovşan, qırmızı konjugat, 1:500) ilə inkubasiya edildi. ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) otaq temperaturunda 2 saat.5 dəqiqə ərzində 10% PBS-də 3 əlavə yuyulmadan sonra bölmələr şüşə slaydlara yerləşdirildi və Fluoromount-G (Invitrogen) ilə bağlandı.Şəkil 3G-də immunoqrafik təsvirlərə baxın.
Infinity3 rəqəmsal kamerasından (Lumenera, Ottava, Ontario, Kanada) və Zeiss mikroskopuna qoşulmuş yüngül mühərrikdən (Lumencor, Beaverton, OR) istifadə edən flüoresan mikroskop, beynin hər bir bölgəsindən, o cümlədən, beynin hər bir bölgəsindən şəkillər əldə etmək üçün istifadə edilmişdir. İmmunofluoressensiya olmadan IL.enjeksiyon sahəsinin düzgün yerləşdirilməsini təsdiqləmək üçün həyata keçirilir.Hüceyrələrin sayılması üçün istifadə edilən şəkillər 20x böyüdülmə ilə əldə edilmişdir.Hər toxuma bölməsi üçün GFP-nin vizuallaşdırılmasına imkan verən filtrlə bir şəkil və ikincili antikorda Alexa Fluor qırmızı konjugatının vizuallaşdırılmasına imkan verən filtrlə bir şəkil çəkin və görüntü üçün proqram təminatı (Sonsuzluq Analizi, versiya 3) istifadə edilmişdir. üst-üstə düşmə.Eyni məruz qalma müddəti və qazanc parametrlərindən istifadə edərək beynin bütün sahələrinin bütün şəkillərini əldə edin.Altı siçovul analizdən çıxarıldı, çünki virusun əsas ötürülməsi IL-dən kənarda baş verdi (88% hit nisbəti).Daha səkkiz siçovul xaric edildi, çünki virusun IL-yə hücum etməsinə baxmayaraq, onlar maraq doğuran bütün hədəf beyin bölgələrində kifayət qədər GFP ifadəsi göstərmədilər.Bundan əlavə, zəif toxuma keyfiyyətinə görə bir siçovul xaric edildi.
Hər şəkil üçün eyni prosedurdan istifadə edərək J (NIH) şəklində fon səs-küyünü azaltmaq üçün parlaqlığı və kontrastı tənzimləyin.Ümumi retrograd etiketli hüceyrələr, ümumi Fos-etiketli hüceyrələr və cəmi ikiqat etiketli hüceyrələr üçün hüceyrə sayları Image J sitometr plaginindən istifadə edərək heyvanları müəyyən etməyən eksperimentator tərəfindən əl ilə həyata keçirilib.Hüceyrə sayı normallaşdırıldı hüceyrə/mm2.IL-proyeksiya edən hüceyrələrdə Fos ifadəsini təhlil etmək üçün ikiqat etiketli hüceyrələrin sayı retrograd etiketli hüceyrələrin ümumi sayına normallaşdırıldı.mBLA, mvHPC və pvHPC analizi üçün çoxsaylı 20x şəkillərdən hüceyrə sayıları cəmləndi və hüceyrə/mm2-ə normallaşdırıldı.Beynin qalan hissələrinin təhlili üçün 20x təsvir və ya 20x təsvirin bir hissəsi təhlil edildi və hüceyrə/mm2-ə normallaşdırıldı.vHPC analizinə CA1, CA2 və subdominant vHPC bölgələri daxil edilmişdir.Şəkil 1, təyyarənin ön-arxa sərhədini təsvir edən şəkillərlə təhlil edilən beyin bölgələrini göstərir.
Maraqlanan beyin bölgələrinin qısaldılması və yeri.Əlyazmada verilmiş abbreviaturaların və beyin bölgələrinin yerlərinin izahı.İctimai sahənin beyin xəritəsi Swanson (2004)-dən götürülmüş Beyin Xəritəsi: Siçovul Beyinin Strukturu, 3-cü Nəşr, Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 Beynəlxalq Lisenziyası (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) əsasında lisenziyalaşdırılmışdır. ./), https://larrywswanson.com saytından yükləmək mümkündür.
Dondurma vaxtının faizi aralıq intervallar istisna olmaqla, 30 saniyəlik ton oxutma müddəti ərzində orta hesabla götürülür.Sönməni xatırlama dərəcələri ilk 4 sönmə təlimi sınağı zamanı sönmə faizi kimi sönmənin geri çağırılması zamanı sönmə vaxtının faizini ifadə etməklə hesablanmışdır (ilk dörd sönmə məşq tonu zamanı dörd sönməni xatırlama tonu zamanı solma/sönmə*100).Aşağı ballar yaxşı solğun yaddaşı, yüksək ballar isə zəif yaddaşı göstərir.Siçovullar nəslini geri çağırma balına görə çeşidləndi, nəsli kəsilməni xatırlama balının ilk üçdə birində olan siçovullar “pis nəsli kəsilən siçovullar” kimi təsnif edildi və nəsli kəsməni xatırlama balının son üçdə ikisində olan siçovullar “yaxşı” kimi təsnif edildi.Yaddaş zəifləyən siçovullar.
Qeyri-parametrik testlərdən istifadə olunur, çünki məlumatlar çox vaxt dispersiyaların normal paylanması və/yaxud homojenliyi haqqında fərziyyələri pozur.Spearmanın rütbə korrelyasiyası nəsli geri çağırma sınağına məruz qalan bütün siçovullarda sönmə geri çağırma balları ilə Fos markerləri və maraq doğuran beyin bölgələrində ikili markerlər arasında əhəmiyyətli bir əlaqənin olub olmadığını müəyyən etmək üçün istifadə edilmişdir.İki müstəqil qrup arasında fərqin olub olmadığını müəyyən etmək üçün Mann-Whitney U-testindən istifadə edilmişdir.2 və ya daha çox qrupun bir-birindən fərqli olub-olmadığını müəyyən etmək üçün Kruskal-Vallis testindən, Kruskal-Vallis statistikası əhəmiyyətli olduqda isə Dunn çoxsaylı müqayisə testindən istifadə edilir.Mövzulararası amil kimi qrup və fənlərarası amil kimi test ilə variasiyanın təkrar ölçmə təhlilindən istifadə edilməklə, sönmə öyrənmə zamanı zəifləmə qiymətləndirildi. Bütün statistik testlər üçün p <0.05 olduqda nəticələr əhəmiyyətli hesab edildi. Bütün statistik testlər üçün p <0.05 olduqda nəticələr əhəmiyyətli hesab edildi. Результаты считались значимыми при p < 0,05 üçün bütün statistik testov. Nəticələr bütün statistik testlər üçün p <0.05-də əhəmiyyətli hesab edildi.当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 üçün bütün statistik testov. Nəticələr bütün statistik testlər üçün p <0.05-də əhəmiyyətli hesab edildi.
Şəkil 2 eksperimental qrafiki (Şəkil 2A) və nəsli kəsilməyə məruz qalan bütün siçovulların tezlik paylanmasını göstərir (Şəkil 2B). Yaxşı və zəif nəsli kəsmə qruplarında olan siçovullar bu hesablanmış nəslini geri çağırma ballarında (U = 0, p <0.001) əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi (Şəkil 2C). Yaxşı və zəif nəsli kəsmə qruplarında olan siçovullar bu hesablanmış nəslini geri çağırma ballarında (U = 0, p <0.001) əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi (Şəkil 2C). Крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим рассчитанным показателям припоминания угашения (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Yaxşı və zəif nəsli kəsilmə qruplarında olan siçovullar bu hesablanmış nəslini geri çağırma dərəcələrində əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmişdir (U=0, p<0.001) (Şəkil 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差0.（（（（） 2C). U = 0，p <0,001）（图2C， Bu etix рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​группах с хорошим və плохим угашением различались (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Bu hesablanmış nəsli kəsmə geri çağırma dərəcələrində yaxşı və zəif nəsli kəsmə qruplarında olan siçovullar əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi (U = 0, p <0.001) (Şəkil 2C).Qorxu şərtli refleks seansının əsas dövründə (X2 (2) = 2.746, p = 0.253) yaxşı sönmə, zəif sönmə və qorxu xatırlama ilə qruplar arasında donma müddətində əhəmiyyətli fərq yox idi (Şəkil 2D).Bundan əlavə, qorxu şərti refleksinin ilk tonunun təqdimatı zamanı yaxşı sönmə, zəif sönmə və qorxu geri çağırma qrupları arasında donma müddətində əhəmiyyətli bir fərq yox idi (X2 (2) = 1.107, p = 0.575), kimi həmçinin ikinci tonlar zamanı qorxu zamanı.Kondisioner seansı zamanı yaxşı sönmə, zəif sönmə və qorxu geri çağırışı (X2 (2) = 2.214, p = 0.331) olan qruplar arasında donma müddətində əhəmiyyətli fərq var idi (Şəkil 2D).Əsas sönmə təlimi dövründə (U = 45.00, p = 0.799) yaxşı və zəif yoxsulluq qrupları arasında solma müddətində əhəmiyyətli fərq yox idi (Şəkil 2D). Sonra, sınaq blokunun (hər blok üçün 5 ton) yox olma təliminin baş verdiyini göstərən (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001) zamanı dondurma zamanı əhəmiyyətli bir əsas təsiri var idi (Şəkil 2D). ). Sonra, sınaq blokunun (hər blok üçün 5 ton) yox olma təliminin baş verdiyini göstərən (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001) zamanı dondurma zamanı əhəmiyyətli bir əsas təsiri var idi (Şəkil 2D). ). Zatem nablyudalsya znachitelnyy əsaslı effekt probnoqo bloka (5 ton na blok) vremya, zatrachivaemoe na zamiranie vo vremya trenirovki ugasheniya (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), heç bir problem yoxdur 2D). Daha sonra sınaq blokunun (hər blok üçün 5 ton) yox olma təlimi zamanı dondurulmaq üçün sərf olunan vaxta əhəmiyyətli əsas təsiri var idi (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), bu, sönmə öyrənilməsinin baş verdiyini göstərir (Şəkil 2). 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主有显着的主有显48.（F8.（庼31，p < 0.001），表明发生了消退学习（图2D）） 。接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主有显着的主有显48.（F8.（庼31，p < 0.001），表明发生了消退学习（图2D）） 。 Затем, в время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001) 2D). Sonra, sönmə öyrənmə zamanı sınaq blokları (hər blok üçün 5 ton) sönmə müddətinə əhəmiyyətli dərəcədə əsas təsir göstərdi (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), bu, sönmə öyrənilməsinin baş verdiyini göstərir (Şəkil .2D) .Bununla belə, sönmə qrupu (F(1, 19) = 3.091, p = 0.095) bütün sönmə təlim dövrü ərzində solma müddətinə əhəmiyyətli təsir göstərməmişdir və sınaq bloku ilə sönmə qrupu (F(4) arasında heç bir qarşılıqlı əlaqə yox idi. , 19)) .76) = 1.890, p = 0.121) (şək. 2D). Sınaq sessiyası zamanı yaxşı sönmə, zəif sönmə və qorxu geri çağırma qrupları arasında ilkin dövr ərzində donma zamanı (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu əhəmiyyətli dərəcədə dondu. yaxşı sönmə qrupundan daha çox (Orta Sıra Fərq = 10.57, p = 0.017), lakin yoxsul yoxsulluq qrupundan deyil (Orta Sıra Fərq = - 3.714, p > 0.999) (Şəkil 2D). Sınaq sessiyası zamanı yaxşı sönmə, zəif sönmə və qorxu geri çağırma qrupları arasında ilkin dövr ərzində donma zamanı (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu əhəmiyyətli dərəcədə dondu. yaxşı sönmə qrupundan daha çox (Orta Sıra Fərq = 10.57, p = 0.017), lakin yoxsul yoxsulluq qrupundan deyil (Orta Sıra Fərq = - 3.714, p > 0.999) (Şəkil 2D).Sınaq sessiyası zamanı yaxşı yox olma, zəif yox olma və qorxu geri çağırma qrupları arasında ilkin dövr ərzində donma zamanı (X2(2) = 8,569, p = 0,014) əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu dondu. əhəmiyyətli dərəcədə.больше, чем в группе хорошего вымырания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), lakin nə в группе плохого вымырания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). yaxşı sönmə qrupundan (orta dərəcə fərqi = 10,57, p = 0,017) daha böyükdür, lakin pis sönmə qrupunda deyil (orta dərəcə fərqi = -3,714, p > 0,999) (Şəkil 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间，良好消退组、不良消组、 (2) = 8,569，p = 0,014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，s，，）（9（9）在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 冻结 时间 冻结 时间（（x2 (2) = 8.569， p = 0.014） 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组（平均秩差= – 3,714）0.（99（D） В технический периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,50 страницы, повести). зает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), lakin nə qrupa с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). Sınaq dövründə, yaxşı yoxolma qrupu, zəif yoxsulluq qrupu və qorxu geri çağırma qrupu arasında ilkin vəziyyətdə donma vaxtı baxımından əhəmiyyətli fərq var idi (X2 (2) = 8.569, p = 0.014), beləliklə, qorxu geri çağırdı. qrup yaxşı məhv olan qrupdan (orta dərəcə fərqi = 10.57, p = 0.017) əhəmiyyətli dərəcədə daha tez-tez donur, lakin zəif məhv olan qrupa deyil (orta dərəcə fərqi = -3.714, p > 0.999) (Şəkil 2D).Yaxşı sönmə qrupu, yoxsul sönmə qrupu və qorxu geri çağırma qrupu da sınaq sessiyasının ton təqdimatı zamanı əhəmiyyətli dərəcədə fərqli sönmə vaxtlarına malik idi (X2(2) = 14.93, p = 0.001), buna görə də yaxşı sönmə qrupu əhəmiyyətli dərəcədə az idi. vaxt.zəif extinction qrup (orta rütbə fərqi = 9.286, p = 0.044) və qorxu yaddaş qrupu (orta rütbə fərqi = 13.86, p = 0.001) daha donma vaxtı (Şəkil. 2D).
Nəsli kəsilmənin xatırlanmasında fərdi fərqlər.(A) Cərrahi və davranış prosedurlarının konturları.(B) Yaddaşın itirilməsi ballarında fərdi fərqləri göstərən tezlik paylanması.(C) Hesablanmış sönmə geri çağırma ballarına əsaslanan qrupların iki fərqli fenotipi təmsil etdiyinə dair sübut.(D) 20, 30 s tonlarda, sönmə öyrənmə sessiyası zamanı 5 bloka dağılan şərti qorxu refleksi seansının 30 saniyəlik hüceyrələrində pis nəsli kəsilmək, yaxşı məhv olmaq və qorxunu xatırlamaq üçün siçovulların donma vaxtının orta faizi (4 ton) .hər biri) və dörd tonda sönmə xatirələri və qorxu xatirələri seanslarında.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001。 *p < 0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
IL-ə retrograd göstərici yeridildi (Şəkil 3A) və maraq dairəsinin ön-arxa oxu boyunca GFP+ hüceyrələrinin sayı müəyyən edildi (Şəkil 3B-F).Anterior, orta və posterior PVT (X2(2) = 8.200, p = 0.017) arasında GFP + hüceyrələrinin sayında əhəmiyyətli fərq var idi, buna görə də mPVT aPVT (orta dərəcə) Fərqindən əhəmiyyətli dərəcədə daha çox GFP + hüceyrələri göstərdi.= 18,37, p = 0,035) və pPVT (orta rütbə Fərqi = 17,71, p = 0,045) (Şəkil 3C).Bir neçə heyvan pCLA-da heç bir GFP+ hüceyrəsi aşkar etməsə də və buna görə də bu bölgədə aktivliyi xəritələyə bilməsə də, ön, orta və arxa CLA arasında əhəmiyyətli fərq yox idi (X2(2) = 5.596, p = 0.061).GFP+ hüceyrələrinin sayı (Şəkil 3D).Daha sonra bir neçə siçovulda aBLA və ya avHPC-də bəzi GFP+ hüceyrələri tapıldığı üçün bu sahələrin yalnız ortası və arxası təhlil edilmişdir.Orta və arxa BLA (U = 393, p = 0.009) GFP + hüceyrələrinin sayında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi, buna görə də pBLA mBLA-dan daha çox IL proyeksiyalarını göstərdi (Şəkil 3E).Eynilə, orta və arxa vHPC-lər arasında əhəmiyyətli fərq var idi, buna görə də pvHPC-lər mvHPC-lərdən (U = 403.5, p = 0.014) daha çox IL proqnozlarını göstərdi (Şəkil 3F).Şəkil 3G Fos, aavRG-GFP və ikiqat etiketli hüceyrələri göstərən nümunəvi şəkildir.
Maraqlanan bütün beyin bölgəsində IL afferentlərini ölçün.(A) Bütün siçovul IL-də aavRG-CAG-GFP-nin paylanmasının sxematik təsviri.(B) maraq beyin regionda müxtəlif anteroposterior yerlərdə retrograd markerlər nümayəndəsi şəkillər.Ön arxa ox (C) paraventrikulyar talamus, (D) körpücük sümüyü, (E) bazolateral badamcıq və (F) ventral hipokampus boyunca retrograd etiketləmənin miqdarı.(G) aPVT-də retrograd aavRG etiketlənməsi, Fos etiketlənməsi və ikiqat aavRG və Fos etiketlənməsini göstərən nümayəndə şəkilləri.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01.Ölçək çubuğu 100 µm.A panelindəki ictimai sahə beyin xəritəsi Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Buraxılış kitabından çıxarılıb, Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 Beynəlxalq Lisenziyası (https://creativecommons.org/licenses/by-nc) ilə lisenziyalaşdırılıb. )./4.0/) https://larrywswanson.com saytından yükləmək olar.
Qlobal və IL proyeksiyasına xas Fos fəaliyyəti bütün siçovullarda aPVT, mPVT və pPVT-də təhlil edilmişdir.aPVT-də (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (Şəkil 4A) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi, nə də Fos arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi. aPVT-də ifadə və sönmə geri çağırma (rs = 0.092, p = 0.691) (Şəkil 4B) və ya aPVT IL afferentlərində Fos ifadəsi və sönmə geri çağırma arasında (rs = 0.143, p = 0.537) (Şəkil 4D).Bununla belə, aPVT IL afferentlərində, Fos ifadəsi yaxşı tükənmə, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları (X2 (3) = 15.05, p = 0.002) arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi, buna görə də qorxu geri çağırma qrupu nisbətən yaxşı tükənmə göstərdi.reqressiya (orta dərəcə fərqi = 11.54, p = 0.003), zəif reqressiya (orta rütbə fərqi = 10.57, p = 0.034) və ev hüceyrəsi (orta rütbə fərqi = 12.79, p = 0.005) qrupları (Şəkil 4C).Bundan əlavə, mPVT-də Fos ifadəsi (X2(3) = 2.272, p = 0.518) (Şəkil 4E) və mPVT-də Fos ifadəsi üçün yaxşı tükənmə, zəif tükənmə, qorxu geri çağırma və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi..Sönmənin geri çağırılması ilə əhəmiyyətli korrelyasiya (rs = 0,168 p = 0,468) (Şəkil 4F).IL afferent mPVT hüceyrələrində (X2 (3) = 9.252, p = 0.026) Fos ifadəsində yaxşı, pis, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq olmasına baxmayaraq, post hoc müqayisəsi heç bir və ya ikisini ortaya qoymadı.Qruplar arasında əhəmiyyətli fərqlər (Şəkil 4G).Bundan əlavə, IL-afferent mPVT hüceyrələrində Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması (rs = 0.174, p = 0.450) arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi (Şəkil 4H). Sonra, pPVT-də (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi, belə ki, yaxşı yox olma qrupu (Orta Sıralama) Fərq = 14.96, p = 0.010), lakin zəif yox olma (Orta Sıra Fərq = 12.86, p = 0.113) və ya qorxu geri çağırma qrupu (Orta Sıra Fərq = 2.571, p > 0.999) deyil, daha çox Fos ifadəsi nümayiş etdirdi. ev qəfəs qrupu (Şəkil 4I). Sonra, pPVT-də (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi, belə ki, yaxşı yox olma qrupu (Orta Sıralama) Fərq = 14.96, p = 0.010), lakin zəif yox olma (Orta Sıra Fərq = 12.86, p = 0.113) və ya qorxu geri çağırma qrupu (Orta Sıra Fərq = 2.571, p > 0.999) deyil, daha çox Fos ifadəsi nümayiş etdirdi. ev qəfəs qrupu (Şəkil 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​експрессии Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), eyni dərəcədə uqa rəngim (xredaş uqa rəngim) Fərq = 14,96, p = 0,010), lakin nə в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) və ya qrupы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p = 0,099), выраженная экспрессия Fos, chem v qrupe qrupa domashnix kletok (ris. 4I). Bundan əlavə, pPVT-də (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) Fos ifadəsində yaxşı nəsli kəsmə, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi, beləliklə yaxşı yox olma qrupu (orta dərəcə Fərq. = 14.96, p = 0.010), lakin yoxsul yox olma qrupunda (orta dərəcə fərqi = 12.86, p = 0.113) və ya qorxu yaddaşı qrupunda (orta dərəcə fərqi = 2.571, p> 0.999) deyil, daha aydın Fos ifadəsini göstərdi. ev hüceyrə qrupu (Şəkil 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显间 存在 显睂 （39 （3开 （3开， p = 0.003） 使得 消组 （（（Rank Fərqi.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Orta Reytinq Fərqi. = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Orta Reytinq 2.9.（9.（9) 或恐惧回忆组家庭笼组（图4I ）.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Orta Reytinq Fərqi = 12.86, p = 0.113) ）。İkincisi, yaxşı, pis, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) arasında pPVT-də Fos ifadəsində əhəmiyyətli fərqlər var idi, bu da yaxşı qəbul qrupunu (orta dərəcə fərqi = 14.96) etdi., p = 0,010), lakin не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) və ya qrupe отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в в домашней клет группе (домашней клет.) . , p = 0,010), lakin ev hüceyrə qrupundan (Şəkil 4I) yox yox olma (orta dərəcə fərqi = 12,86, p = 0,113) və ya qorxu geri çağırma qrupunda (orta rütbə fərqi = 2,571, p> 0,999) daha pis deyil..Bununla belə, pPVT Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması (rs = 0.051, p = 0.825) arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi (Şəkil 4J).Nəhayət, yaxşı sönmə, zəif sönmə, qorxu xatirələri və ev hüceyrələrində (X2(3) = 12.34 p = 0.006) qruplar arasında pPVT IL afferentlərində Fos ifadəsində əhəmiyyətli fərq var idi, buna görə də IL-də yaxşı Fos ifadəsi idi. yox olma qruplarından daha pis (orta dərəcə fərqi = 12.54, p = 0.014) və ev hüceyrəsində (orta rütbə fərqi = 12.89, p = 0.049) (Şəkil 4K) və aktivləşdirmə ilə pPVT daxilində IL afferentləri ilə əhəmiyyətli dərəcədə korrelyasiya edilmişdir. sönmənin ləğvi, daha yaxşı sönmənin geri çağırılması bu IL afferentlərinin daha çox aktivləşməsi ilə əlaqələndirildi (rs = -0.438, p = 0.047) (Şəkil 4L).
Siçovullarda posterior paraventrikulyar talamusun (PVT) IL afferentlərində yaxşı reqressiya göstərən fos aktivliyi artmışdır.(A) aPVT-də Fos ifadəsində qruplar arasında əhəmiyyətli fərqlər yox idi.(B) aPVT-də Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(C) Qorxu geri çağırma qrupu, bütün digər qruplarla müqayisədə IL afferentlərində artan Fos ifadəsini göstərdi.(D) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə aPVT-də sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(E) mPVT-də Fos ifadəsində əhəmiyyətli qruplararası fərq yox idi.(F) mPVT-də Fos ifadəsi ilə sönmə yaddaşı arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(G) mPVT-də afferent IL hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(H) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə mPVT-də sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(I) Yaxşı məhv olmuş qrup, lakin başqa heç bir qrup, ev qəfəs qrupu ilə müqayisədə pPVT-də artan Fos aktivliyi göstərməmişdir.(J) pPVT-də Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(K) Yaxşı sönmə qrupu zəif yox olma qrupu və ev hüceyrə qrupu ilə müqayisədə IL afferent hüceyrələrində artan Fos ifadəsini göstərdi.(L) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya var, ona görə də yaxşı sönmə xatırlaması IL afferentlərində daha çox Fos ifadəsi ilə əlaqələndirilir.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01.
Sonra bütün qruplarda siçovulların aCLA və mCLA-da qlobal və IL proyeksiyasına xas Fos aktivliyi təhlil edildi. aCLA-da (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu (Orta Sıra Fərq. = 14.50, p = 0.049), lakin nə yoxsullar (Orta Sıra Fərqi. = 10.21, p = 0.373), nə də yaxşı tükənmə (Orta Reytinq Fərqi = 4.607, p > 0.999) qrupları, ev qəfəs qrupundan daha çox Fos ifadəsi göstərməmişdir ( Şəkil 5A). aCLA-da (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu (Orta Sıra Fərq. = 14.50, p = 0.049), lakin nə yoxsullar (Orta Sıra Fərqi. = 10.21, p = 0.373), nə də yaxşı tükənmə (Orta Reytinq Fərqi = 4.607, p > 0.999) qrupları, ev qəfəs qrupundan daha çox Fos ifadəsi göstərməmişdir ( Şəkil 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), eyni zamanda qrupa 4, p = 0,036, eyni zamanda 4, plominaniya 4, pərakəndə rəng = 0,049), lakin ni plohaya (srednya rangovaya разница = 10,21, p = 0,373), ni qrupa s xorohim vymiraniem (srednya rangovaya разница = 4,607, p > 0,999) nə demonstrirasiya oluna bilməz (srednya rəngovaya разница = 10,21, p = 0,999) 5А). aCLA Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev hüceyrələri qrupları (X2(3) = 8.455, p = 0.036) arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, qorxu geri çağırma qrupu (orta dərəcə fərqi = 14.50, p). = 0,049), lakin nə yoxsullar (orta dərəcə fərqi = 10,21, p = 0,373), nə də yaxşı tükənmə qrupu (orta dərəcə fərqi = 4,607, p > 0,999) ev hüceyrə qrupundan daha çox Fos ifadəsi göstərməmişdir (Şəkil .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着州存在显着川(式2) = 3.08.因此恐惧回忆组(Orta Sıra Fərqi. = 14.50，p = 0.049），但无论是差（平均秩差= 10.21，p = 0.373）还是良好灭绝（平均秩.（平均秩.，差9.，都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 家庭 笼组 之间 存在 显着 巂宮巂宮巂异异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (demək Rank Fərqi = 14.50 ， P = P = P = P = P = 14. 0.049） 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， 3） 罥（平均 秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Bla значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos in aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), poэтому страны отзыва, p = 0,036 (sred 1, p) = 0,049), lakin qrupları с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокой, чрис экспрессию Fos. 5A). aCLA Fos ifadəsində (X2(3) = 8.455, p = 0.036) yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi, buna görə də qorxu geri çağırma qrupu (orta dərəcə fərqi = 14.50), p = 0.049 ), lakin zəif (orta rütbə fərqi = 10.21, p = 0.373) və yaxşı tükənmə (orta dərəcə fərqi = 4.607, p > 0.999) olan qruplar ev hüceyrə qrupundan daha yüksək Fos ifadəsini göstərdi (Şəkil 5A). .Qlobal Fos ifadəsi (rs = 0,036, p = 0,876) (Şəkil 5B) və ya IL aCLA afferent hüceyrələrindəki Fos ifadəsi (rs = -0,282, p = 0,215) və sönmə geri çağırılması (Şəkil 5B) arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi..5D), həmçinin aCLA IL afferentlərində (X2(3) = 6.722, p = 0.081) (Şəkil 5C) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi..). Sonra, mCLA-da (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) Fos ifadəsindəki yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, yaxşı yox olma qrupu (Orta Sıra Fərqi) . = 12.93, p = 0.038), lakin nə yoxsulluq (Orta Sıra Fərqi = 5.143, p > 0.999), nə də qorxu geri çağırma qrupları (Orta Sıra Fərqi = 14.00, p = 0.063) əhəmiyyətli dərəcədə daha çox CLA ifadəsi göstərdi. ev qəfəs qrupuna nisbətən (Şəkil 5E). Sonra, mCLA-da (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) Fos ifadəsindəki yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, yaxşı yox olma qrupu (Orta Sıra Fərqi) . = 12.93, p = 0.038), lakin nə yoxsulluq (Orta Sıra Fərqi = 5.143, p > 0.999), nə də qorxu geri çağırma qrupları (Orta Sıra Fərqi = 14.00, p = 0.063) əhəmiyyətli dərəcədə daha çox CLA ifadəsi göstərdi. ev qəfəs qrupuna nisbətən (Şəkil 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​е экспрессии Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), təxəyyüllə əlaqə saxlayın (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) рангов . = 12,93, p = 0,038), lakin ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,0 показали) ekspressi Fos və mCLA. Daha sonra mCLA Fos ifadəsində (X2(3) = 10.12, p = 0.018) yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatirələri və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli bir fərq var idi, belə ki, yaxşı yox olma qrupu (orta fərq dərəcəsi = 12.93, p). = 0,038), lakin nə yoxsul məhv qrupları (orta dərəcə fərqi = 5,143, p> 0,999), nə də qorxu xatırlama qrupları (orta dərəcə fərqi = 14,00, p = 0,063) mCLA-da əhəmiyyətli dərəcədə daha çox Fos ifadəsi göstərməmişdir.ev qəfəs qrupu ilə müqayisədə (Şəkil 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回 回间 显着 差异 （x2 （3） = 10,12, p = 0,018）, 良好 （（（（（（ （（（ Orta Rank Fərqi.= 12.93, p = 0.038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5.143，p > 0.999）和恐惧回（04.忆忆忆忆，p = 0.063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 mcla 中 Ｑ消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ＄差 ， 9， 9， 9， 9， 弱消退.平均 秩差 = 14.00 ， p = 0.063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos in mCLA nabludalasy znachitelnaya raznica mejdu qrupları ilə uyğunluq təşkil edir, qrupların plohim ugaganiem, qrupların s otzyvom o strahe və qrupoy ilə domashney kletkoy (X2(3) = 10,12, p = 0,01) угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), lakin в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов, p = 19, p = 190) = 0,063). Bundan əlavə, mCLA-da Fos ifadəsində yaxşı nəsli kəsmə qrupu, zəif yoxsulluq qrupu, qorxu ilə bağlı rəy qrupu və ev hüceyrə qrupu (X2(3) = 10.12, p = 0.018) arasında əhəmiyyətli fərq var idi, beləliklə, yaxşı sönmə (orta rütbə fərqi = 12.93, p = 0.038), lakin mCLA-da nə zəif sönmə (orta dərəcə fərqi = 5.143, p > 0.999), nə də qorxu geri çağırma qrupu (orta dərəcə fərqi = 14.00, p = 0.999) = 0.06 daha yaxşı göstərdi. Ev hüceyrə qrupu ilə müqayisədə Multi Fos ifadəsi (Şəkil 5E).Bununla belə, qlobal Fos ifadəsi mCLA (rs = 0.321, p = 0.156) (Şəkil 5F) və ya afferent IL mCLA hüceyrələrində (rs = -0.121, p = 0.602) və sönmə geri çağırılması (Şəkil 5H), arasında əhəmiyyətli fərq yoxdur. yaxşı tükənmə, zəif tükənmə, qorxu geri çağırma və IL mCLA afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi üçün bir ev hüceyrəsi olan qruplar (X2 (3) = 4.923, p = 0.178) (Şəkil 5G).
Yaxşı nəsli kəsilmə yaddaşı olan siçovullarda orta klastrumda Fos aktivliyi yüksəlmişdir.(A) Qorxu geri çağırma qrupu, lakin digər qruplar deyil, aCLA-da ev hüceyrəsi qrupu ilə müqayisədə artan Fos aktivliyi göstərdi.(B) aCLA-da Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(C) IL afferent aCLA hüceyrələrində fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(D) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə aCLA-da sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(E) Quyu sönmüş qrup, lakin digər qruplar deyil, ev hüceyrə qrupu ilə müqayisədə mCLA-da artan Fos aktivliyi göstərdi.(F) mCLA-da Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(G) IL mCLA afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(H) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə mCLA-da sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir. *p <0,05. *p <0,05. *r < 0,05. *p <0,05. *p <0,05. *p <0,05. *r < 0,05. *p <0,05.
Sonra bütün siçovul qruplarında mBLA və pBLA-da qlobal və IL proyeksiyasına xas Fos aktivliyi təhlil edildi.mBLA-da (X2 (3) = 0.944, p = 0.815) (Şəkil 6A) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi.IL mBLA afferent hüceyrələrində yaxşı reqressiya, zəif reqressiya, qorxu xatırlama və ev hüceyrəsi Fos ifadəsi olan qruplar arasında da əhəmiyyətli fərq yox idi (X2 (3) = 0.518, p = 0.915) (Şəkil 6C).Bundan əlavə, mBLA-da qlobal Fos ifadəsi (rs = 0.126, p = 0.588) (Şəkil 6B) və IL mBLA afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi (rs = 0.200, p = 0.385) (rs = 0.200, p) arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi. = 0,385).p = 0,385).Şəkil 6D) və sönmənin geri çağırılması.pBLA-da (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (Şəkil 6E) Fos ifadəsində yaxşı tükənmə, zəif yox olma, qorxu yaddaşı və ev hüceyrə qruplarında əhəmiyyətli bir fərq də yox idi və həmçinin əhəmiyyətli fərq yox idi. pBLA-da Yaxşı.IL afferent hüceyrələrində (X2 (3) = 1.954, p = 0.582) (Şəkil 6G) Fos ifadəsində yox olma, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev hüceyrə qrupları.Nəhayət, pBLA-da qlobal Fos ifadəsi (rs = 0.070, p = 0.762) (Şəkil 6F) və pBLA IL afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi (rs = 0.122, p = 0.597) və sönmə geri çağırılması (Şəkil 6H).
Nəsli kəsilmə çoxalmasında fərdi fərqlər bazolateral amigdalada Fos ifadəsindəki fərqlərlə əlaqələndirilməmişdir.(A) mBLA-da Fos ifadəsində əhəmiyyətli qruplararası fərq yox idi.(B) mBLA-da Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(C) IL mBLA afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(D) IL afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi ilə mBLA-da yox olma geri çağırılması arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi.(E) pBLA-da Fos ifadəsində əhəmiyyətli qruplararası fərq yox idi.(F) pBLA-da Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(G) Afferent IL pBLA hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(H) IL afferent hüceyrələrində Fos ifadəsi ilə pBLA-da yox olma geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir.
Nəhayət, qlobal və IL proyeksiyasına xas Fos fəaliyyəti bütün siçovullarda mvHPC və pvHPC-də təhlil edildi. MvHPC-də (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) Fos ifadəsindəki yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, yaxşı tükənmə (Orta Sıra Fərqi = 13.29) , p = 0,031), lakin nə yoxsul yoxsulluq (Orta dərəcə fərqi. = 6,857, p> 0,999), nə də qorxu xatırlama (Orta dərəcə fərqi. = 8,000, p = 0,864) qrupları ev qəfəs qrupundan daha çox Fos ifadəsi göstərdi (Şəkil . 7A). MvHPC-də (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) Fos ifadəsindəki yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev qəfəs qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi ki, yaxşı tükənmə (Orta Sıra Fərqi = 13.29) , p = 0,031), lakin nə yoxsul yoxsulluq (Orta dərəcə fərqi. = 6,857, p> 0,999), nə də qorxu xatırlama (Orta dərəcə fərqi. = 8,000, p = 0,864) qrupları ev qəfəs qrupundan daha çox Fos ifadəsi göstərdi (Şəkil . 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха və домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее 2, p = 0,045) = 0,031), lakin ni в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ni v qrupe s otzyvom straha (srednya rangovaya разница = 8,000, p = 0,864) ekspressiya с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999) клеткой (рис. 7А). Yaxşı sönmə, zəif yox olma, qorxu geri çağırma və ev hüceyrələri (X2(3) = 8.056, p = 0.045) olan qruplar arasında mvHPC Fos ifadəsində əhəmiyyətli fərq var idi, belə ki, yaxşı tükənmə (orta dərəcə fərqi = 13.29), p = 0,031), lakin nə yoxsul yoxsulluq qrupunda (orta dərəcə fərqi = 6,857, p> 0,999), nə də qorxu xatırlama qrupunda (orta dərəcə fərqi = 8,000, p = 0,864) Fos ifadəsi ev qrupundan daha yüksək idi.hüceyrə (Şəkil 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显的良好消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显的良好消退、不良在显的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显的良好消退、不良好消退、中Fos 045），因此良好消退（平均秩差= 13,29）， p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6.857，p > 0.999）还是恐惧回忆（平均秩忆（平均秌.Ｑ08.（平均秌）08.都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 家庭 笼组 之间 存圀 （2） .056, p = 0,045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 （幧箮0.（幧箷差p = 0.864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ））））））））））)））））））））））））））) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» və «домашняя hüceyrə» üçün ekspressii Fos v mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, сия = хорошая реңков 13,29), p = 0,031), lakin qrupları so slabım угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) домашней клетке (ris. 2). MvHPC-də (X2(3) = 8.056, p = 0.045) Fos ifadəsi üçün yaxşı, pis, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq var idi və buna görə də yaxşı reqressiya (orta dərəcə fərqi = 13.29), p = 0,031), lakin zəif məhv olan qruplar (orta dərəcə fərqi = 6,857, p> 0,999) və qorxu xatirələri (orta dərəcə fərqi = 8,000, p = 0,864) ev qəfəsindəki qrupdan daha yüksək Fos ifadəsi göstərdi (Şəkil 2).7A).Bununla belə, əhəmiyyətli fərq yox idi (X2 (3) = 4.893, p = 0.180) (Şəkil 7C).Bundan əlavə, mvHPC-də qlobal Fos ifadəsi (rs = -0.233, p = 0.309) (Şəkil 7B) və mvHPC afferent IL hüceyrələrində Fos ifadəsi (rs = 0.056, p = 0.810) (Şəkil 7D) arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi.və itkin düşmə haqqında hesabat.Bundan əlavə, pvHPC-də (X2(3) = 3.623, p = 0.353) (Şəkil 7E) Fos ifadəsində yaxşı yox olma, zəif yox olma, qorxu xatırlama və ev hüceyrə qrupları arasında əhəmiyyətli fərq yox idi və əhəmiyyətli fərqlər yox idi.pvHPC afferent IL hüceyrələrində Fos ifadəsinin yaxşı reqressiyasında fərq, zəif reqressiya, qorxu yaddaşı və ev hüceyrə qrupları (X2 (3) = 3.871, p = 0.276) (Şəkil 7G).Nəhayət, pvHPC qlobal Fos ifadəsi (rs = -0.127, p = 0.584) (Şəkil 7F) və IL-afferent pvHPC hüceyrələrində Fos ifadəsi (rs = 0.176, p = 0.447) və sönmə geri çağırışı (Şəkil 7F) arasında əhəmiyyətli bir əlaqə yox idi. ).7H).
Fos ifadəsi siçovulların ventral hipokampusunda yüksəlir, bu, yaxşı yaddaşın məhv olduğunu göstərir.(A) Quyu sönmüş qrup, lakin digər qruplar deyil, ev hüceyrə qrupu ilə müqayisədə mvHPC-də Fosun ifadəsinin artdığını göstərdi.(B) mvPHC-də Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(C) mvHPC afferent IL hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(D) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə mvHPC-də sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(E) pvHPC-də Fos ifadəsində qruplar arasında əhəmiyyətli fərqlər yox idi.(F) pvHPC-də Fos ifadəsi ilə sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.(G) pVHPC afferent IL hüceyrələrində Fos ifadəsi qruplar arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi.(H) IL afferentlərində Fos ifadəsi ilə pvHPC-də sönmənin geri çağırılması arasında əhəmiyyətli korrelyasiya yox idi.Səhv çubuqları ortanın standart sapmasını təmsil edir. *p <0,05. *p <0,05. *r < 0,05. *p <0,05. *p <0,05. *p <0,05. *r < 0,05. *p <0,05.Bütün bölgələr üçün ilkin təhlilimiz anteroposterior ox boyunca üç səviyyədə müqayisə göstərdi, baxmayaraq ki, biz anteroposterior ox boyunca çökən hər bir bölgəni də təhlil etdik.Bu təhlillərin nəticələri cədvəl 1-də təqdim olunur.
Burada sönmənin geri çağırılmasında fərdi fərqlərin aşağı limbik korteksdə afferent fəaliyyətin müxtəlif nümunələrində əks olunub-olunmayacağını yoxladıq.Bu məqsədlə, tükənmə təkrarından sonra paraventrikulyar talamus, klaustrum, bazolateral badamcıq və ventral hipokampusdan IL proqnozlarında Fos fəaliyyətini qiymətləndirdik.IL-proyeksiya edən hüceyrələrdə, zəif məhv olan siçovullarla müqayisədə yaxşı nəslini geri çağıran siçovullarda PVT-nin arxa bölgəsində daha yüksək aktivlik tapdıq.Klavikulyar nüvədən, ventral hipokampusdan və ya bazolateral tonzildən IL afferentlərində heç bir fərq yox idi.IL-proyeksiya edən hüceyrələrə əlavə olaraq, yaxşı həlli ilə siçovul klaustrumunun və ventral hipokampusun seçilmiş sahələrində artan sinir fəaliyyəti müşahidə edildi.Nəticələrimiz göstərir ki, müvəffəqiyyətli məhvetmə yaddaşı klaustrum və ventral hipokampusda IL və qeyri-il hədəflənən hüceyrələrə xüsusi PVT proqnozları ilə təşkil edilir.
Biz PVT IL proqnozunun nəsli kəsilmənin yaxşı xatırlanması göstərən siçovullarda aktiv olduğunu aşkar etdik ki, bu da PVT-nin nəsli kəsmənin geri çağırılması üçün tələb olunduğunu göstərən son araşdırmaya uyğundur.Bu tədqiqat subregiona xas manipulyasiyalardan istifadə etmədi, lakin göstərdi ki, həm mərkəzi lateral amigdala üzrə PVT proyeksiyaları, həm də PVT-də IL proyeksiyaları yox olmağın təkrarlanması üçün lazım idi.Nəticələrimiz göstərir ki, IL-PVT-CeL zəncirinə əlavə olaraq, söndürmənin geri çağırılması üçün IL-ə PVT-dən sonrakı giriş də tələb oluna bilər.Beləliklə, sönmənin çoxalmasında həm efferent, həm də afferent İL əlaqələrinin iştirak etdiyi ortaya çıxır.Növbəti vacib addım, pPVT-nin neyron dövrə səviyyəsində yox olma reproduksiyası siqnalına nə səbəb olduğunu müəyyən etməkdir.IL ilə əlaqəyə əlavə olaraq, əvvəlki kanal izləmə tədqiqatları31,32 göstərdi ki, pPVT ventral periaqueductal bozdan (vPAG) daxil olur ki, bu da sönmə öyrənilməsi ilə əlaqələndirilir33,34,35,36.vPAG-nin nəsli kəsilmənin xatırlanmasında rolu müəyyən edilməsə də, vPAG tərəfindən pPVT-nin proqnozlaşdırılması onların sıxlığına və hər iki bölgənin qorxunun yox olmasının əvvəlki sübutlarının yaradılmasında iştirakına görə cəlbedici namizəddir.
PVT nəticələrimizin digər mühüm cəhəti onların ön-arxa oxu boyunca ixtisaslaşmış olmasıdır.Təəccüblüdür ki, IL-də PVT proyeksiyasının neyron fəaliyyəti əks davranış vəziyyəti ilə əlaqələndirilir, belə ki, IL-də PVT-dən əvvəlki proyeksiya fəaliyyəti qorxunun xatırlanması ilə əlaqələndirilir, pPVT proyeksiyası isə uğurlu geri çağırışdan sonra (yəni, qorxu) aktivdir.PVT daxilindəki bu funksional heterojenlik əvvəlki işləri nəzərə alaraq təəccüblü deyil [37-də müzakirə olunur].PVT-də funksional paylanmanın parlaq nümunəsi bu yaxınlarda PVT-də xüsusi hüceyrə növlərinin xüsusiyyətlərini xarakterizə edən bir araşdırmada ortaya çıxdı.Bu araşdırma göstərir ki, DRD2-ifadə edən dopamin hüceyrələri əsasən pPVT-də ifadə olunur, ön ayaqların qabığını innervasiya edir və aqressiv stimullara cavab verir.İkinci hüceyrə populyasiyası əsasən aPVT-də ifadə edilir və aşağı fizioloji həyəcan vəziyyətinə keçidi qeyd edir və aşağı ətrafların korteksini innervasiya edir.Nəticələrimiz çətin ki, bu modelə uyğun gəlmir, çünki IL-proyeksiya edən aPVT hüceyrələri qorxunun xatırlanması zamanı aktivdir, pPVT proqnozları isə aktivdir və heyvanlar qorxu səviyyəsinin aşağı olduğunu göstərir.Görünən uyğunsuzluğun ən azı iki mümkün izahı var.Birincisi, müəyyən edilmiş hüceyrə növləri yalnız TVV-nin bir anterior-posterior yerində yerləşmir.Beləliklə, yaxşı sönmə yaddaşına malik siçovullarda aktiv IL-proyeksiya edən pPVT hüceyrələri aPVT-də aşkarlanma ehtimalı daha yüksək olan və aşağı həyəcan vəziyyətinə keçid siqnalı verən hüceyrələr sinfinə aid ola bilər.Eyni şey qorxu yaddaşından sonra aktivləşdirilmiş aPVT-də IL-proyeksiya edən hüceyrələrə də aid ola bilər.İkincisi, əvvəlki izləmə tədqiqatları IL3-proyeksiya edən pPVT-lərin mövcudluğunu müəyyən etmişdir, baxmayaraq ki, bəziləri DRD2 ehtiva edən hüceyrələrdən törəmiş kimi görünsə də, digər hüceyrə növləri IL-ə proyeksiya edə və söndürmənin uğurla çoxalmasından sonra aktivləşə bilər.
Bu tədqiqatın məqsədi müxtəlif nəsli kəsilmə fenotipləri nümayiş etdirən siçovullar arasındakı fərqləri müəyyən etmək olsa da, bu təcrübələr qorxu yaddaşı mexanizmləri ilə bağlı yeni məlumatları da ortaya qoydu.Maraqlıdır ki, qorxu yaddaşı olan siçovullarda anterior CLA-da artan Fos aktivliyini tapdıq.
Körpücük sümüyü kortikal ünsiyyət mərkəzi kimi yerləşdirilir və həssas inteqrasiyadan diqqət və yuxuya qədər olan proseslərdə iştirak edir40,41,42,43.Klaustrumun qorxu kondisionerində və ya qorxu ifadəsində necə iştirak etdiyinə dair məhdud sübutlar var, lakin əvvəlki tədqiqatlar kontekstli qorxu ifadəsinin klaustrumdakı Fos fəaliyyətində iştirak etdiyini göstərdi.Bu yaxınlarda bildirilmişdir ki, kontekstli qorxu kondisioneri zamanı entorinal korteksdə atreziya proyeksiyalarının qarşısının alınması uzunmüddətli yaddaşın formalaşmasına mane olur, baxmayaraq ki, onların qorxu ifadəsinə ehtiyacı sınaqdan keçirilməyib.Eyni araşdırmada, tanış mühitə məruz qalan siçanlarla müqayisədə heyvanlar yeni bir mühitə məruz qaldıqda Fos aktivliyinin artması müşahidə edilmişdir.Bunu nəzərə alaraq, burada bildirdiyimiz CLA aktivasiyası geri çağırılma qorxusu deyil, sınaq zamanı yeni kameraya məruz qalma ilə bağlı ola bilər.Qorxu və situasiya emalında qıfılların funksiyasını daha dəqiq xarakterizə etmək üçün gələcək tədqiqatlar məqsədli kilid manipulyasiyasından istifadə etməlidir.
Əvvəlki iş PVT-nin qorxu yaddaşının ifadəsi ilə əlaqəli olduğunu göstərsə də, 45,46,47 kondisionerdən 48 saat sonra qorxunu xatırlayan siçovullarda ümumi Fos ifadəsində heç bir dəyişiklik müşahidə etmədik.Bu fərqi bir neçə faktorla izah etmək olar, o cümlədən əvvəlki iş sınaqları kondisionerin baş verdiyi eyni kontekstdə diskret işarələrin qorxusu, bizim təcrübəmizdə isə sınaq yeni otaqda aparılıb.Bundan əlavə, biz heyvanlarımızı sınaqdan 60 dəqiqə sonra evtanaziya etdik, halbuki əvvəlki işdə 90 dəqiqəlik bir zaman nöqtəsi istifadə edildi.Nəhayət, əvvəlki tədqiqatlarda sınaq heyvanların iştaha ilə cavab verə biləcəyi bir otaqda aparıldı, halbuki bizim işimizdə siçovullar iştaha cavab vermədən sınaqdan keçirildi.Bu, müəyyən dərəcədə şərtləndirilmiş inhibəyə imkan versə də, heyvanların qida əldə etmək üçün təzyiqə mane olmasına icazə verilməsinin əsas stimullaşdırıcı amil olan motivasiya münaqişəsi (yəni, qorxu və mükafat) yaradıb-yaratmadığını yoxlayan sübutlar var.iştirak PVT48, 49. .
Bazolateral amigdalanın qorxunun məhv edilməsində iştirak etdiyi bilinir50,51 və IL-ə BLA proqnozlarının da bu prosesdə iştirak etdiyinə dair sübutlar var23.Bununla belə, BLA-nın və onun əlaqələrinin sönmə qayıdışında iştirak edib-etmədiyi aydın deyil.Təsvir tədqiqatları23,28 solmuş xatirələri xatırladan heyvanlarda BLA aktivliyinin artdığını göstərdi.Əvvəlki işimiz yaxşı və pis nəsli kəsilən siçovullar arasında BLA aktivləşdirilməsində heç bir fərq göstərməsə də, buradakı nəticələrimiz göstərir ki, nəsli kəsilmiş siçovulların geri çağırılması ümumiyyətlə BLA-ya və ya BLA IL-in proqnozlaşdırılmasında aktivləşməyə təsir etmir.Nəticələrimizə uyğun olaraq, dövrə manipulyasiyası tədqiqatları BLA-ya IL girişlərinin nəsli kəsilmənin öyrənilməsi üçün vacib olduğunu göstərsə də, sönmənin xatırlanması üçün lazım deyil.Bununla belə, BLA-nın rolunu tamamilə nəzərdən qaçırmaq olmaz, çünki son sübutlar, BLA-dakı müəyyən hüceyrə növlərinin məhv olması üçün tələb olunduğunu göstərir.
Qeyd edək ki, qorxunun xatırlanması BLA-da Fosun aktivləşməsi ilə nəticələnmədi, çünki əvvəlki lezyon, dərman və görüntüləmə tədqiqatları axtarışdan sonra bu sahəni qorxu ifadəsi və/yaxud qorxunun yenidən konsolidasiyasına aid etmişdir54,55,56,57.Burada təqdim olunan məlumatlar amigdalanın bazal və lateral subnükleusunu birləşdirir və əvvəlki məlumatlar qorxu ifadəsinin yan nüvənin dorsal tərəfində Fos fəaliyyətini idarə etdiyini göstərir.Biz əsas və yan məlumatları ayrıca təhlil etdik, lakin hər iki halda heç bir fərq yox idi (məlumatlar göstərilmir) və burada təqdim etdiyimiz məlumatlarda hər iki sahə çökdü.Yanal amigdalanın subregionlarını təhlil etmədik, buna görə də bu sahədə spesifik dəyişikliklər maskalana bilər.BLA-da Fos fəaliyyətinin dəyişməməsinin başqa bir ehtimalı kondisionerlə müqayisədə qorxu xatirələrinin vaxtı ilə bağlıdır.Əvvəlki bəzi işlər göstərmişdir ki, BLA-nın qorxu ifadəsinə töhfəsi şərtləndirildikdən sonra zamanla azalır, beləliklə ifadə kondisionerdən 24 saat sonra BLA-dan asılıdır, lakin 7 gündə müstəqil olur (istinad 45, lakin 58-ə baxın).Təlimdən 48 saat sonra meydana gəldi, bu zaman Fos fəaliyyətində dəyişiklik olmaması ehtimal ki, qorxu ifadəsində BLA iştirakında zamandan asılı dəyişiklikləri əks etdirir.
Nəhayət, müvəffəqiyyətli sönmə yaddaşının ventral hipokampusla əlaqəli olduğuna dair sübut tapırıq.Bu, "aralıq" vHPC-lər üçün xarakterikdir, çünki arxa bölgədə eyni nümunə görünmür.Əvvəlki işlərə uyğun olaraq, afferent vHPC IL-lərdə Fos aktivləşdirilməsində heç bir dəyişiklik tapmadıq.CS solğunluğun baş verdiyi kontekstdən kənarda baş verdikdə qorxunun reallaşdırılması üçün vHPC28,60,61 tələb olunduğuna və bunun ən azı qismən IL13-ə vHPC-nin daxil olmasından asılı olduğuna dair əsaslı sübutlar var.Bu əvvəlki nəticələrə əsasən, zəif solğunluğun vHPC-nin proqnozlaşdırılan artan IL aktivliyi ilə əlaqəli olacağını gözləyərdik.Bununla belə, bu belə deyildi, çünki IL ilə proqnozlaşdırılan retrograd etiketli vHPC-lərdə və ya vHPC-lərdə etiketlənməmiş hüceyrələrdə Fos aktivliyində heç bir fərq yox idi.Bu onu göstərir ki, solğunluq kontekstində solğunluğu xatırlaya bilməmək yenilənmə qorxusundan fərqli bir mexanizmi işə sala bilər.
Dizayn və təhlilə xas olan bəzi məhdudiyyətləri və onların nəticələrimizə necə təsir etdiyini qeyd etmək vacibdir.Əvvəlcə heyvanları yuxarı və aşağı üçdə, siçanları isə “yaxşı” və “pis”ə böldük.Bu, heyvanları paylanmanın ortasından ayrı-ayrı qruplara ayıran qrup sxemlərinin və ya heyvanları paylanmanın ortasından kənarlaşdıran qrup sxemlərinin, məsələn, mediana görə ayrılması və ya siçovulların yuxarı və aşağı üçdə birinin müqayisəsi kimi qrup sxemlərinin qarşısını almaq üçün edilir. .biz bu vəziyyətdən qaçmaq istəyirik, çünki orta bölgü, modelləşdirməyə çalışdığımız travmaya insan reaksiyalarının dəyişkənliyini əks etdirmir.Bundan əlavə, siçovulların yuxarı və aşağı üçdə bir hissəsinin müqayisəsi bizə oxşar ölçülü qrupları müqayisə etməyə imkan verir, bu yanaşma paylanma mərkəzindəki heyvanlara məhəl qoymur və zədəyə reaksiyaların dəyişkənliyini dəqiq əks etdirmir.Metodumuz heterojen dispersiya və qeyri-bərabər nümunə ölçüləri olan qrupların müqayisəsi ilə bağlı problemlərdən əziyyət çəksə də, o, alternativ metodlardan daha yaxşı təqlid etməyə çalışdığımız şeyi tutur.
Burada təqdim olunan nəticələr sönmənin geri çağırılmasındakı fərdi fərqlərin neyron dövrə fəaliyyətindəki fərqlərdə necə əks olunduğunu daha yaxşı anlamağa kömək edir.Tapdıqlarımız həddindən artıq qorxu və qorxu reaksiyalarını aradan qaldıra bilməmə ilə əlaqəli olduğu bilinən travma sonrası stress pozğunluğu ilə əlaqəli ola bilər.Biz göstəririk ki, sönmənin geri çağırılmasındakı fərqlər IL-ə proqnozlaşdırılan daxili və xarici sinir fəaliyyətindəki fərqlərlə əlaqələndirilir.Bu fərqlər anteroposterior ox boyunca fərqli bölgələr arasında paylandı və subregional səviyyədə beyin funksiyasının qiymətləndirilməsinin vacibliyini daha da vurğuladı.Mövcud metodun çatışmazlıqları tədqiqatın aktuallığını və erkək gəmiricilərə diqqəti əhatə edir.Gələcək tədqiqatlar dişi gəmiricilərdə nəsli kəsilməsinin öyrənilməsinin əsasını təşkil edən neyrobioloji mexanizmləri müəyyən etməli və səbəb-nəticə çıxarmaq üçün metodlardan istifadə etməlidir.
Cari tədqiqatda istifadə edilən və/yaxud təhlil edilən məlumat dəstləri əsaslı sorğu əsasında müvafiq müəlliflərdən əldə edilə bilər.
Pavlov IP Kondisioner: beyin qabığının fizioloji fəaliyyətinin tədqiqi.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Travma sonrası reaksiyaların müalicəsində öyrənmə prinsiplərinin tətbiqi. Rothbaum, BO, & Davis, M. Travma sonrası reaksiyaların müalicəsində öyrənmə prinsiplərinin tətbiqi.Rotbaum BO və Davis M. Posttravmatik reaksiyaların müalicəsində öyrənmə prinsiplərinin tətbiqi.Rotbaum BO və Davis M. Post-travmatik reaksiyaların müalicəsində öyrənmə prinsiplərinin tətbiqi.yüklemek.Nyu York Kolleci.elm.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozisiya terapiyasının nəzərdən keçirilməsi: TSSB müalicəsi üçün qızıl standart. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozisiya terapiyasının nəzərdən keçirilməsi: TSSB müalicəsi üçün qızıl standart.Rauch SA, Eftekhari A. və Ruzek DI Ekspozisiya terapiyasına baxış: posttravmatik stress pozğunluğu üçün qızıl standart müalicə. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ekspozisiya terapiyasının nəzərdən keçirilməsi: TSSB müalicəsi üçün qızıl standart.Rauch, SA, Eftekhari, A. və Ruzek, DI Ekspozisiya terapiyasının nəzərdən keçirilməsi: posttravmatik stress pozğunluğu üçün qızıl standart müalicə.J. Reabilitasiya.su anbarının işlənməsi 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Uzun məruz qalma terapiyası: keçmiş, indiki və gələcək.Anksiyetenin Repressiyası 28, 1043-1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Cənab Millard və b.Post-travmatik stress pozğunluğunda yaddaş itkisinin mövcud və qazanılmış səbəbləri: əkiz tədqiqatın nəticələri.J. Psixiatr.saxlama çəni.42(7), 515-520 (2008).
Cənab Millard və b.Post-travmatik stress pozğunluğunda solğun xatirələri xatırlaya bilməməyin neyrobioloji əsasları.biologiya.Psixologiya.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Qorxuda fərdi fərqlər: Qorxu reaktivliyinin və qorxunun bərpası fenotiplərinin təcrid edilməsi. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Qorxuda fərdi fərqlər: Qorxu reaktivliyinin və qorxunun bərpası fenotiplərinin təcrid edilməsi.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. və LeDoux, JE Qorxuda fərdi fərqlər: qorxu reaktivliyinin və qorxunun bərpasının fenotiplərinin fərqləndirilməsi. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异:隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Qorxuda fərdi fərqlər: qorxu reaksiyasının təcrid edilməsi və qorxunun bərpası cədvəli.Buş, DEA, Sautre-Baillon, F. və LeDoux, JE Qorxuda fərdi fərqlər: qorxu reaksiyalarının təcrid edilməsi və qorxunun bərpası fenotipi.J. Travma.təzyiq 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Siçovullarda akustik həyəcan reaksiyası qorxunun yox olmasında fərdlər arası dəyişkənliyi proqnozlaşdırır. Russo, AS & Parsons, RG Siçovullarda akustik həyəcan reaksiyası qorxunun yox olmasında fərdlər arası dəyişkənliyi proqnozlaşdırır.Russo, AS və Parsons, RG siçovullarda Akustik həyəcan reaksiyası qorxunun yox olmasında fərdi fərqləri proqnozlaşdırır. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS və Parsons, RG siçovullarda Akustik həyəcan reaksiyası qorxunun yox olmasında fərdi fərqləri proqnozlaşdırır.Neyrobiologiya.öyrənmək.Yaddaş.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Qorxunun sönməsinin geri çağırılmasında fərdi dəyişkənlik infralimbik korteksdə mitogenlə aktivləşdirilmiş protein kinazın fosforlaşması ilə əlaqələndirilir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Qorxunun sönməsinin geri çağırılmasında fərdi dəyişkənlik infralimbik korteksdə mitogenlə aktivləşdirilmiş protein kinazın fosforlaşması ilə əlaqələndirilir.Russo, AS, Lee, J. və Parsons, RG Qorxunun məhv olmasının fərdi dəyişkənliyi infralimbik korteksdə mitogenlə aktivləşdirilmiş protein kinaz fosforlaşması ilə əlaqələndirilir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂原活化蛋白原活化蛋白白白 Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Qorxu sönməsinin xatırlanması periferik 美裯中丝裂原活化筒能激酶的fosforlaşmada fərdi fərqlərlə bağlıdır.Russo, AS, Lee, J. və Parsons, RG Geri çağırma zamanı qorxunun tükənməsindəki fərdi fərqlər alt ekstremitələrin korteksində mitogenlə aktivləşdirilmiş protein kinazalarının fosforlaşması ilə əlaqələndirilir.Psixofarmakologiya 236(7), 2039–2048 (2019).